色譜柱分為毛細管柱和填充色譜柱

一,在選擇合適的色譜柱時，需考慮的因素有很多：

（1）選擇一個(ge) 固定相，根據分析對象的選擇性、極性和固定相分子中苯基含量進行仔細判定；

（2）要了解色譜柱直徑如何影響柱效、溶質保留值、柱頭壓和載氣流速等因素；

（3）確定多長的柱長會(hui) 影響溶質的保留值、柱頭壓及成本；

（4）從(cong) 柱容量、惰性、流失和溫度上限出發，正確評估薄、厚液膜色譜柱的不同。

二,要選擇色譜柱，首先需要確定要使用的是填充柱還是毛細管柱。

填充柱比毛細管柱具有更高的樣品容量，雖然這一差距由於(yu) HP發明了大孔 530mm 毛細管而大大縮小。檢測器靈敏度的改進也減少了對大劑量樣品的需要。填充柱可能具有優(you) 勢的領域是氣體(ti) 樣品的分析。現代高效液相色譜中，分離效果好壞很大程度上取決(jue) 於(yu) 色譜填料的選擇。

三，毛細管柱

1.色譜柱材料,這種材料必須盡可能是惰性的，尤其是對於(yu) 痕量分析或容易拖尾的化合物，例如硫醇或類似的活性化合物。對於(yu) 毛細管柱，熔融石英是可選的材料。

有兩(liang) 種類型的熔融石英毛細管柱：壁塗開管柱 (WCOT) 色譜柱和多孔層開管柱 (PLOT) 色譜柱。WCOT 色譜柱是固定相液膜塗漬在去活的色譜柱壁上。這是氣相色譜中最常用的色譜柱。PLOT 色譜柱中固定相是固體(ti) 物質塗漬到色譜柱壁上。

填充柱可以是玻璃或金屬，通常是不鏽鋼的。金屬雖然比較有活性，但其對非極性物質比較穩定。但是如果樣品中有極性組分需要分析，請選擇玻璃柱。如果玻璃柱還是活性強（引起峰拖尾、樣品丟(diu) 失等），請進行去活處理。

2.固定相,選擇毛細管柱時，首先需要確定是否需要 PLOT 色譜柱。下麵是 3 種 PLOT 色譜柱的典型應用領域：分子篩 不揮發氣體(ti) ，對水比較敏感二乙烯基苯 (DVB) — HP-PLOT Q C1 到 C3 全部異構體(ti) 的分離，部分 C4 和更高的（直到 C14）的異構體(ti) 分離，極性化合物，揮發性溶劑可以允許含水氧化鋁 Al2O3 C1 到 C10 異構體(ti) 的分離, 對水比較敏感.

四,填充色譜柱

1.正相色譜,正相色譜用的固定相通常為(wei) 矽膠（Silica），以及其他具有極性官能團，如胺基團

(NH2,APS)和氰基團（CN，CPS）的鍵合相填料。由於(yu) 矽膠表麵的矽羥基（SiOH）或其他團的極性較強，因此，分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小，即極性強弱的組份最先被衝(chong) 洗出色譜柱。

2.反相色譜,反相色譜填料常是以矽膠為(wei) 基礎，表麵鍵合有極性相對較弱的官能團的鍵合相。

反相色譜所使用的流動相極性較強，通常為(wei) 水，緩衝(chong) 液與(yu) 甲醇，已腈等混合物。

樣品流出色譜柱的順序是極性較強組合最先被衝(chong) 出，而極性弱的組份會(hui) 在色譜柱上有

更強的保留。常用的反相填料有C18（ODS）、C8（MOS）、C4（B）、C6H5（Phenyl）等。

3.聚合物填料,聚合物調料多為(wei) 聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要優(you) 點是在PH值為(wei) 1～14均可使用。相對與(yu) 矽膠基質的C18填料，這類填料具有更強的疏水性；大孔的聚合物填料對蛋白質等樣品的分離非常有效。現在的聚合物填料的缺點是相對矽膠基質填料，色譜柱柱效較低。

4.其他無機填料,其它HPLC的無機填料色譜柱也已經商品化。由於(yu) 其特殊的性質，一般僅(jin) 限於(yu) 特殊的用途。如石墨化碳也用於(yu) 正逐漸成為(wei) 反相色譜填料。這種填料的分離不同與(yu) 矽膠基質烷基鍵合相，石墨化碳的表麵即是保留的基礎，不再需其它的表麵改性，該柱填料一般比烷基鍵合矽膠或多孔聚合物填料的保留能力更強，石墨化碳可用於(yu) 分離某些幾何導構體(ti) ，又由於(yu) HPLC流動相中不會(hui) 被溶解，這類柱可在任何PH與(yu) 溫度下使用。氧化鋁也可用於(yu) HPLC，氧化鋁微粒剛性強，可製成穩定的色譜柱柱床，其優(you) 點是可在PH高達12的流動相中使用。但由於(yu) 氧化鋁與(yu) 堿性化合物作用也很強，應用範圍受到一定的限製，所以未能廣泛應用，新型氧化鋯填料也可用於(yu) HPLC，商品化的僅(jin) 有聚合物塗層的多孔氧化鋯微球色譜柱，應用PH範圍1～14，溫度可達100℃。由於(yu) 氧化鋯填料幾年才開始研究，加之麵臨(lin) 的實驗難度，其重要用途與(yu) 優(you) 勢尚在進行中。