二手多級質譜聯用之時間串聯質譜法實驗步驟

二手多級質譜聯用是通過對一級或上級質譜產(chan) 生離子的進一步裂解產(chan) 生次級質譜，並對次級質譜進行質量分析的技術。依據實現方式，多級質譜可分為(wei) 兩(liang) 類：一類是時間串聯質譜，它是利用某些質量分析器能夠儲(chu) 存離子的特性，在同一個(ge) 質量分析器上，通過時間序貫實現多級質譜分析；另一類是空間串聯質譜，它是利用多個(ge) 質量分析器在空間上串聯從(cong) 而實現多級質譜的功能。

二手多級質譜聯用之時間串聯質譜法
時間串聯質譜主要是由離子阱或FT一ICR完成操作。從(cong) “硬件”方麵來看，隻需要一個(ge) 質量分析器，因而儀(yi) 器費用較空間串聯質譜要低，這是時問串聯質譜的最大優(you) 點。

也正因為(wei) 這個(ge) 原因，時間串聯質譜可達到多級(MSn)，這是空間串聯質譜所不能及的。

在離子阱中完成串聯質譜的實驗步驟組成：
①按前述的離子阱穩定性圖，選擇適當的u、P值，可選出某一質荷比的離子貯存在離子阱中，質荷比更大或更小的其它離子均逐出離子阱。
②進行碰撞誘導斷裂CID。由於(yu) 離子阱在運行時是充氦氣的，加大初始離子(pre．cursor ion)的動能即可實現CID。例如，在端蓋極上加一個(ge) 輔助的正弦波形的“擾動(tickle)”電位，其頻率調諧至離子運動的基頻，因此離子從(cong) 這個(ge) 輔助的“擾動"電場中吸收能量，這是一個(ge) 共振激發的過程。仔細控製擾動電位的振幅，使離子不致於(yu) 從(cong) 離子阱中逐出，但離子已從(cong) 離子阱的中心拉出來，增加了動能，和氦氣分子碰撞，發生CID。
③進行質量掃描，得到產(chan) 物離子的質譜，這由掃描V而完成。
以上一個(ge) 循環由計算機控製完成。必要時，可進行下一級乃至多級(Msn)實驗。
由於(yu) 離子在離子阱中不斷作回旋性的運動，因而有較高的碰撞效率。時間串聯質譜隻能完成產(chan) 物離子掃描，不能進行初始離子掃描和中性碎片丟(diu) 失掃描，但產(chan) 物離子掃描是最重要的一種掃描。

二手多級質譜法

離子阱質譜法(ITMS)和傅裏葉變換離子回旋共振質譜法(FTICRMS,即FTMS)的發展，使MSn(n>2)成為(wei) 可能，這兩(liang) 種方法均有離子貯存及選擇性排斥功能。MSn實驗是通過軟件實現的，樣品離子化後，用脈衝(chong) 程序將選定的m／z離子以外的其他離子排斥出去，用脈衝(chong) 閥導入碰撞氣體(ti) ，將選定的離子加速至足夠的動能，經CID得到產(chan) 物離子。上述程序可重複進行，直至實現MSn。

二手多級質譜法的源內(nei) CID(in—source CID)是利用API—MS的離子傳(chuan) 輸區的電場，在約133Pa的壓力下，碰撞誘導離子裂解，產(chan) 生CID譜。

優(you) 點：碰撞活化效率高，因而靈敏度高；簡便，不必知道Ma+的m／z；可選擇的能量範圍較寬，以適應於(yu) 不同穩定性的化合物；儀(yi) 器簡單、價(jia) 廉。所以，在藥物分析中可以解決(jue) 多數定性、定量問題。

缺點：如有雜質及共流出峰存在將產(chan) 生複雜的結果；由於(yu) 需進行色譜分離，因而增加了分析時間。

無論是哪種方式的串聯，都必須有碰撞活化室，從(cong) 第一級MS分離出來的特定離子，經過碰撞活化後，再經過第二級MS進行質量分析，以便取得更多的信息。