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首頁-譜標服務-質譜儀(yi) 與(yu) 其他技術的結合

質譜儀與其他技術的結合

發布時間:2022-07-12       點擊次數:5949

質譜儀(yi) 與(yu) 其他技術的結合:液相色譜(LC),氣相色譜(GC),毛細管電泳(CE)和凝膠電泳(GE)是常見的示例。與(yu) ICP-MS和DART-MS結合使用時,方法的組合尤為(wei) 常見。

1、氣相色譜質譜法(GC-MS)

GC是一種分析/分離技術,其中將複雜的化合物混合物注入色譜柱中,並根據其相對沸點和對色譜柱的親(qin) 和力進行分離。GC中使用的高溫使其不適合用於(yu) 高分子量化合物(例如蛋白質),因為(wei) 它們(men) 會(hui) 使熱量變性。它非常適合用於(yu) 石化,環境監測和修複以及工業(ye) 化學領域。樣品本質上可以是固體(ti) ,液體(ti) 或氣體(ti) 。分離後,可以通過質譜技術(例如ICP-MS)分析化合物以進行鑒定,或使用EI或CI將其離子化,然後在ToF質量分析器17中進行分析。

2、液相色譜質譜法(LC-MS)

LC與(yu) 氣相色譜相似,不同之處在於(yu) 樣品現在處於(yu) 液相狀態。將樣品溶解在溶劑中,然後注入到色譜柱中,該色譜柱由可溶化合物(流動相)和固相(固定相)組成。樣品成分與(yu) 色譜柱固定相之間的相對親(qin) 和力導致樣品成分分離,然後可以通過質譜檢測。由於(yu) 流出物處於(yu) 液相狀態,因此這種分離技術非常適合與(yu) ICP-MS和ESI-MS方法結合使用,但也發現與(yu) 離子阱和Orbitrap質譜儀(yi) 相關(guan) 。

3、交聯質譜(XL-MS)

了解多蛋白複合物的結構和組織對於(yu) 了解細胞功能至關(guan) 重要。化學交聯與(yu) 質譜聯用(XL-MS)是一種方法,可與(yu) 諸如低溫電子顯微鏡(cryo-EM)和X射線晶體(ti) 學之類的結構生物學技術互補,但可提供較低分辨率的結構信息。在XL-MS中,蛋白質或蛋白質複合物用交聯劑處理,該交聯劑會(hui) 在蛋白質中的特定官能團之間引入共價(jia) 鍵。然後將交聯的蛋白質用分解該蛋白質的酶消化,並通過LC-MS方法分析所得混合物,以鑒定交聯的肽並確定其序列。交叉鏈接的位置提供了有關(guan) 正在研究的係統的結構信息。但是,解釋很複雜,因為(wei) 以這種方式製備的樣品比非交聯蛋白的消化物包含的獨特化學種類要多得多。潛在的交聯肽的數目隨序列長度二次增加。盡管如此,XL-MS還是一個(ge) 有用的工具,可幫助開發蛋白質-蛋白質相互作用的結構模型。

4、氫交換質譜(HX-MS)

氫交換質譜(HX-MS)的目標類似於(yu) XL-MS的目標–研究多蛋白複合物,尤其是蛋白結構和動力學。HX-MS的優(you) 勢包括以下事實:它可以探測溶液中蛋白質的結構,因此無需結晶;它僅(jin) 需少量樣品(500-1,000皮摩爾);可以研究難以純化的蛋白質,並且可以揭示結構和動力學隨時間的變化。HX-MS利用化學反應,使蛋白質中的某些H原子與(yu) 溶液中的H原子連續交換。如果將H2O水溶液用重水(D2O)代替,則可以進行此交換過程。特別地,與(yu) 氨基酸主鏈N原子鍵合的H(也稱為(wei) 主鏈酰胺H)可用於(yu) 探測蛋白質結構。H與(yu) D的交換完成後,可以通過MS分析樣品,以提供有關(guan) 具有小分子結合,蛋白質折疊的蛋白質結構變化的信息,或有關(guan) 未結晶或不適合其他結構生物學的蛋白質結構的信息方法。

5、基質輔助激光解吸/電離質譜成像(MALDI-MSI)

MALDI-TOF不僅(jin) 是MS分析的出色方法,而且還能夠通過逐步掃描平台,在重複發射激光的情況下連續掃描平台或通過掃描激光束來生成圖像。這項技術稱為(wei) 基質輔助激光解吸/電離質譜成像(MALDI-MSI)。所得到的圖像可以以50-200mm之間的空間分辨率提供有關(guan) 大型組織切片的大量信息。由於(yu) MALDI是一種軟電離技術,因此分子信息得以保留,因此不需要像熒光顯微鏡那樣標記感興(xing) 趣的化合物進行檢測。因此,它提供了“無標簽”成像的方法。

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