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在發展中求生存,不斷完善,以良好信譽和科學的管理促進企業迅速發展檢測低豐(feng) 度分析物,在複雜樣品中
樣品越複雜,質譜係統越難對低豐(feng) 度分析物進行鑒定和定量分析。SWATH采集技術由TripleTOF技術提供支持,可找到所有可檢測的物質,無論它們(men) 的濃度高低。
檢測複雜樣品中的低豐(feng) 度化合物充滿挑戰,即使對於(yu) 如今功能強大的MS分析儀(yi) 來說也是如此。MS譜中的幹擾會(hui) 導致檢測低含量分析物麵臨(lin) 困難,即使使用高分辨率係統也無法解決(jue) 問題。同時,高含量分析物會(hui) 占用質譜儀(yi) 的大量周期時間(MS/MS一般按強度順序采集),沒有時間捕捉與(yu) 低含量分析物有關(guan) 的MS/MS信息。要解決(jue) 這個(ge) 問題,需要在以下技術性能之間建立重要的相互關(guan) 係:Q1采集窗口控製和在高速下保證MS/MS采集分辨率。
關(guan) 鍵技術標準1:可變窗口采集
SCIEX 的SWATH 采集技術由可變窗口采集提供支持。通過使用可以調整 Q1 隔離窗大小的控件,您可以在樣品密度高的 m/z 區域(預期有大數量的化合物和分析物的區域)利用更小的Q1 m/z 窗口。這樣一來,專(zhuan) 一性會(hui) 更高,從(cong) 而能夠捕捉與(yu) 樣品相關(guan) 的更深入信息,降低漏掉複雜樣品中低豐(feng) 度峰的風險。
以蛋白質組學樣品為(wei) 例
大量肽的質量範圍介於(yu) 500-800 m/z 之間。使用可變窗口采集,您可以在此質量範圍內(nei) 利用更小的 Q1 SWATH 窗口(在此密集樣品區域中覆蓋更多的峰),然後在其他質量範圍內(nei) 使用更寬的窗口。總之,此策略可為(wei) 您提供全麵的分析物覆蓋,並且可以進一步檢測樣品中的低豐(feng) 度化合物。
關(guan) 鍵技術標準2:在高速下保證MS/MS分辨率
如前所述,複雜樣品會(hui) 占用質譜儀(yi) 寶貴的掃描時間,導致係統隻能有足夠的時間捕捉樣品中含量更多的分析物的 MS/MS 信息,而這些分析物可能並不是您要分析的物質。在利用數據依賴型采集策略時,低豐(feng) 度化合物中檢測的峰甚至可能不會(hui) 觸發 MS/MS 采集,而這種采集對化合物鑒定至關(guan) 重要。
借助 TripleTOF6600 和 SWATH采集技術,每秒多可采集 100 張 MS/MS 譜圖,同時不會(hui) 降低光譜分辨率,從(cong) 而提供更高數量的 Q1 窗口。這樣不僅(jin) 可以更好地檢測低含量分析物,重要的是,還可以利用每份樣品完成更多的化合物鑒定和定量分析。
首次分析時可捕捉樣品完整的數字檔案
停止儲(chu) 存樣品,開始儲(chu) 存數據。隻需分析一次,SWATH采集技術就可以收集所需要的與(yu) 樣品相關(guan) 的所有數據。如果分析事件至關(guan) 重要、無法重複分析、樣品數據有限或樣品可能會(hui) 講解,這種技術的優(you) 勢就更為(wei) 明顯。
作為(wei) 非數據依賴型采集策略,SWATH采集技術可以在所有可檢測峰上采集MS和MS/MS信息—如果以後出現新問題,隻需重新查詢樣品數據即可。
對分析物進行定量分析
高質量、高專(zhuan) 一性定量分析的核心在於(yu) 出色的MS/MS靈敏度、寬動態範圍和非凡重現性。SWATH采集技術采用SCIEX TripleTOF技術,可提供上述三種優(you) 勢。
通常,不僅(jin) 僅(jin) 是樣品的成分十分重要,樣品中成分的"含量"對我們(men) 得出的結論或製定決(jue) 策也很關(guan) 鍵。SWATH采集技術是一種非數據依賴型策略,擁有其他技術所不具備的功能。從(cong) 使用高分辨率MS/MS數據(通過MS)提供深度高一個(ge) 數量級的定量覆蓋,到經過驗證的樣品間重現性,SWATH采集可以提供可靠的定量結果,從(cong) 而推進研究,達到標準的MRM定量分析策略水平。
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