高效液相色譜的須知問題

液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因？

1、篩板堵塞或柱失效，解決(jue) 辦法是反向衝(chong) 洗柱子，替換篩板或更換柱子。

2、存在幹擾峰，解決(jue) 辦法為(wei) 使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子。

3、可能柱超載，減少進樣量。

HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決(jue) 辦法是什麽(me) ？

1、樣品量不足，解決(jue) 辦法為(wei) 增加樣品量

2、樣品未從(cong) 柱子中流出。可根據樣品的化學性質改變流動相或柱子

3、樣品與(yu) 檢測器不匹配。根據樣品化學性質調整波長或改換檢測器

4、檢測器衰減太多。調整衰減即可。

5、檢測器時間常數太大。解決(jue) 辦法為(wei) 降低時間參數

6、檢測器池窗汙染。解決(jue) 辦法為(wei) 清洗池窗。

7、檢測池中有氣泡。解決(jue) 辦法為(wei) 排氣。

8、記錄儀(yi) 測壓範圍不當。調整電壓範圍即可。

9、流動相流量不合適。調整流速即可。

10、檢測器與(yu) 記錄儀(yi) 超出校正曲線。解決(jue) 辦法為(wei) 檢查記錄儀(yi) 與(yu) 檢測器，重作校正曲線。

怎樣解決(jue) 做HPLC分析時，柱壓不穩定，原因何在？

1、泵內(nei) 有空氣，解決(jue) 的辦法是清除泵內(nei) 空氣，對溶劑進行脫氣處理；

2、比例閥失效，更換比例閥即可；

3、泵密封墊損壞，更換密封墊即可；

4、溶劑中的氣泡，解決(jue) 的辦法是對溶劑脫氣，必要時改變脫氣方法；

5、係統檢漏，找出漏點，密封即可；

6、梯度洗脫，這時壓力波動是正常的。

出現峰展寬的原因？

1、樣品體(ti) 積過大——用流動相配樣,總的樣品體(ti) 積小於(yu) 第一峰的15%。

2、在進樣閥中造成峰擴展——進樣前後排出氣泡以降低擴散。

3、數據係統采樣速率太慢——設定速率應是每峰大於(yu) 10點。

4、檢測器時間常數過大——設定時間常數為(wei) 感興(xing) 趣第一峰半寬的10%。

5、流動相粘度過高——增加柱溫,采用低粘度流動相。

6、檢測池體(ti) 積過大——用小體(ti) 積池,卸下熱交換器。

7、保留時間過長——等度洗脫時增加強溶劑含量,也可用梯度洗脫。

8、柱外體(ti) 積過大——將連接管徑和連接管長度降至最小。

9、樣品過載——進小濃度小體(ti) 積樣品。

簡單判斷比例閥是否內(nei) 漏？

設定泵使用一個(ge) 單獨通路（A），打開Purge閥，流速5mL/min，提起其他溶劑瓶內(nei) 的溶劑過濾頭直至離開液麵，觀察這些通路（B、C、D）內(nei) 的溶劑是否隨著流動，正常時均不應流動。